由于毛發(fā)基質(zhì)復(fù)雜、藥物濃度低等因素,毛發(fā)驗毒在法庭毒物分析中具有挑戰(zhàn)性。毛發(fā)驗毒過程包括了取樣、去污、水解、提取和儀器分析等多個環(huán)節(jié),實驗室采用不同的毛發(fā)處理方法和分析方法,導(dǎo)致在分析結(jié)果上也存在差異。
缺少準確濃度的毛發(fā)控制樣品是毛發(fā)驗毒領(lǐng)域的難題。分析結(jié)果的準確性和可靠性依賴于質(zhì)量控制和校正方法，在進行方法有效性驗證時應(yīng)采用相同基質(zhì)的質(zhì)控樣品，以消除偏倚，增強準確性。實驗室的質(zhì)量控制也應(yīng)采用相同基質(zhì)的控制樣品，以考察實驗室內(nèi)部的精密度和實驗室間的一致性。
無論是浸泡法還是磨粉法制備頭發(fā)控制樣品，都無法對頭發(fā)中濫用藥物分析的整個過程進行質(zhì)量控制。頭發(fā)的最外部為毛表皮，由無核的鱗狀角化細胞呈疊瓦狀而成，不同的人發(fā)質(zhì)不同，有的為多孔性，有的為少孔性。即使同一人的頭發(fā)之間，多孔性也存在差異。毒物容易進入多孔性的頭發(fā)，同時,也容易被清洗、釋放出。已有的酸水解實驗結(jié)果表明，同一頭發(fā)樣品不同時間取樣，結(jié)果存在較大差異。換言之，剪碎浸泡水解的方法不會造成假陰性結(jié)果，但可能使定量結(jié)果不準確。目前不能確定頭發(fā)的多孔性是影響此差異的主要因素，但是采用研磨粉碎處理頭發(fā)樣品，可以消除由多孔性引起的誤差。另一方面，剪碎后酸水解方法有其相對優(yōu)勢，簡便實用，頭發(fā)基質(zhì)干擾少，為很多實驗室所接受，而采用頭發(fā)粉末樣品則無法考察酸水解方法的釋放程度和穩(wěn)定性等因素。
可能影響萃取的分析參數(shù)有：粒度、萃取時間、能量溫度/振動/超聲、溶劑種類、溶劑體積和萃取步驟的頻率。通過粉碎頭發(fā)來減小顆粒大小，已被證明可以顯著提高乙基葡萄糖醛酸苷和各種濫用藥物的提取率。
毒物可通過多種途徑進人毛發(fā)，從應(yīng)用的角度看，最主要的途徑為血液循環(huán)，學者也期望以此來推斷用藥時間。但實際上，其他入體途徑同時存在，導(dǎo)致毛干中的毒物帶不如理論上僅有血液循環(huán)途徑的清晰。毒物進入毛發(fā)的速率與黑色素親和力、親脂性密切相關(guān)，堿性藥物更容易進入毛發(fā)。
毛發(fā)驗毒的應(yīng)用越來越廣泛，在進行頭發(fā)分析的結(jié)果解釋時應(yīng)考慮頭發(fā)顏色、頭發(fā)生長速度、藥物進入毛發(fā)的機制、藥物在毛干中的保留、穩(wěn)定性等因素，結(jié)合毛發(fā)驗毒的去污處理、清洗標準、cut-off值、原藥與代謝物的比率等多原則進行綜合判斷。毒物進入毛發(fā)的機制也仍需不斷深化研究，以尋找區(qū)分主動吸食與被動污染的有效方法。
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